塑料袋栽培既省工，又便于管理，還能充分利用菇房空間，減少病蟲害，易于栽培成功。它不僅適用于室內栽培，也適于塑料大棚、人防工程等場所栽培，這是近幾年廣泛采用的一種新的栽培法。首先將袋的一端7厘米左右處折迭好或用腳踩住，然后將培養料裝入袋中，每筒裝干料1.8~2公斤，適當壓實，裝至離袋口7厘米左右時，將料壓平，套環后用薄膜封口，用橡皮筋或自行車內胎切剪的膠圈拴緊薄膜和套環。反之亦同。然后把裝滿料的料筒置于常壓灶或簡易滅菌灶內，在溫度100℃保持10~12小時。滅菌過程要注意，溫度要在內小時內戰升到100℃；料筒在鍋內排放時要留有空隙，以便受熱均勻；滅菌中間要及時補加熱水，防止鍋內水燒干。當滅菌鍋（灶）內的溫度降至近室溫時，將料袋搬入接種室。

     由于量較大，通常不用接種箱或超凈工作臺。用紫外線照射和福爾馬林熏蒸消毒，亦可用氣霧消毒劑或其它消毒劑消毒。當料袋溫度降至此28℃以下時可進行接種。接種人員在進入接種室之前要用肥皂或洗衣粉洗手，再用75%酒精擦手。接種用的栽培種亦用75%灑精擦抹菌種瓶（袋）的外壁。有條件的，接種人員要換鞋、工作服及工作帽。封袋口時，將原料封袋口的薄膜棄去，換上經過來菌的報紙或牛皮紙，報紙最好用2、3層，牛皮紙用一層即可。放菌種時，瓶裝菌種用接種鉤或鑷子直接從瓶囁出放入料袋內。若是袋裝菌種，接種人員最好戴上經過消毒的膠手套，將菌袋打開，直接用手取少量菌種放入料袋。封袋口時動作要快，盡量縮短袋料暴露的時間。通常每瓶750毫升菌種瓶裝的菌種可接種18袋左右（料代兩頭接種）。接種完后，將料袋搬進培養室進行培養。用于培養菌絲的培養場所要打掃干凈，并進行必要的消毒與殺蟲處理。